读后感想自动化抗核抗体免疫荧光检测
[背景材料]间接免疫荧光法(IIF)作为自身抗体检测的重要方法,存在多种方法学的局限性,如形态学的特殊培训、结果的合理解释及标准化、自动化程度低等。因此,IIF检测自身抗体也被称为费时、费力和易于偏差的检测技术。然而,美国风湿病学会(ACR)声明IIF应作为抗核抗体(ANA)筛查试验的标准方法。对此,随着生物工程技术的飞速发展,可以提供免疫荧光技术检测自身抗体的自动化方案,它不仅在实验基质片的准备(前处理)方面,也包括结果的荧光显微镜自动判读。因此,本文献报道中的研究目的之一,验证自动化免疫荧光仪对ANA阴/阳性结果判读的准确性;目的之二,分析自动化免疫荧光仪对ANA荧光模型鉴别的准确性,并检查仪器分析信号是否与滴度存在相关性。
[方法]标本:收集例临床确诊自身免疫病(AID)的ANA阳性血清标本[来自意大利检验医学会自身免疫病研究组的8个实验室,标本的收集符合5个标准:(1)临床确诊为AID者;(2)典型的荧光模型;(3)单一荧光模型;(4)有滴度范围;(5)特异性抗体已用其他方法(EIA、LIA、blot)检测],40例健康供血者ANA阴性血清标本。
仪器:6种基于计算机辅助系统的自动化免疫荧光检测仪包括:(1)EUROPattern1.0(EuroimmunAG,Luebeck,Germany);(2)Aklides(Medipan,Dahlewitz,Germany);(3)NOVAView(InovaDiagnostics,SanDiego,CA);(4)Helios(AeskuDiagnostics,Wendelsheim,Germany);(5)ZenitG-Sight(I-SightIFA)(A.MenariniDiagnostics,Florence,Italy);(6)ImageNavigator(ImmunoConcepts,Sacramento,CA)。
实施:每一份血清标本(无荧光模型和滴度信息)送往6个采用不同自动化免疫荧光仪的实验室。自动化检测仪的ANA阴/阳性结果判读至少由6家实验室中的4家结果一致为判断标准,而ANA阳性者的荧光模型、滴度判读以6家实验室中出现高频率的为准。
[结果]
1.6种自动化免疫荧光仪检测ANA的总体灵敏度为96.7%,总体特异性为89.2%。
2.自动化免疫荧光仪检测ANA的假阴性结果主要由胞质型荧光模型(核糖体型、波形蛋白型、线粒体型、溶酶体型)引起,此外,部分细胞核型荧光模型(核多点型、中间体型、核膜型)也会引起假阴性。
3.各种自动化免疫荧光仪的检测光信号强度值与滴度均呈现好的相关性(spearman’sr值0.~0.,P均0.)。
4.自动化免疫荧光仪检测ANA的不精确度(imprecision)范围为1.99%~25.2%,低于人工操作的39.1%。
5.自动化免疫荧光仪对ANA荧光模型的准确识别,主要集中于常见的荧光模型(均质型、斑点型、核仁型、着丝点型、核多点型及胞质型)。
Table3Positiveandnegativeresults,sensitivityandspecificityofthesixautomatedsystemsforANA-IIFscreeningatthemanufacturers’cutoff.
[结论]
1.最近开发的自动化免疫荧光仪,可适合于ANA检测。
2.本研究对同一份血清标本进行6种自动化免疫荧光仪检测ANA,发现在ANA阴/阳性判断中均具有高的诊断效能。
3.自动化免疫荧光仪对ANA荧光模型的准确识别目前仅限于最典型的模型。
4.自动化的自动化免疫荧光仪检测ANA期待在于减少ANA免疫荧光检测时实验室内、实验室间的差异以及提高实验室检测的工作效率。
[展望]目前,用于自身抗体检测的自动化免疫荧光仪制造商正在积极开发新、先进的软件系统,以实现更好的自动识别荧光模型和光信号相关滴度的最终判断。将来这些新的技术设计可避免为判断滴度进行的血清稀释,从而提高经济效益和节省时间具有重要的意义。
读后感想(仅代表个人观点):
自动化是检验医学今后发展的趋势,对于自身抗体的临床检测也是如此。免疫荧光法(常指IIF)作为自身抗体检测的主要方法之一,对某些项目(如ANA)而言甚至被国内外行业学会作为参考方法、标准方法。目前,对于免疫荧光技术检测自身抗体在国内临床实验室仍主要采用人工的实验操作和结果判读,对此带来工作效率的难以提高和结果判读的主观性影响。故此些也成为该项技术在国内临床实验室(特别是中、小医院实验室)难于广泛推广应用的原因之一。而进行免疫荧光技术检测自身抗体的自动化升级,不失为该技术在临床实验室广泛推广突破的举措。
近年来,国外不同品牌的自动化免疫荧光仪器不断见于诸多学术会议的展台,医院的临床实验室中应用。但综观各方面来看,若进行大规模临床推广应用仍存在诸多不足条件,如(1)自动化免疫荧光仪器价格昂贵,而国内对自身抗体检测项目的收费仍较低;(2)自动化免疫荧光仪器检测自身抗体的项目主要集中于ANA检测;(3)自动化免疫荧光仪器检测ANA的结果判读主要针对于单一、典型的荧光模型进行鉴别,对于滴度的最终判断仍是难点。因此,如何真正实现自动化免疫荧光仪器检测自身抗体的临床推广应用仍有很长的路途!
参考文献
BizzaroN,AnticoA,PlatzgummerS,etal.Automatedantinuclearimmunofluorescenceantibodyscreening:a鍖椾含鍝不鐧界櫆椋庢渶濂?娌荤枟鐧界櫆椋?
- 上一篇文章: 石学敏院士针灸,让欧美一流医院认可的底
- 下一篇文章: 抗磷脂抗体,生育的隐形杀手